最初人們發(fā)現(xiàn)很多物質(zhì)都具有顏色,例如Mn04-為紫紅色,F(xiàn)e3+為黃色,當(dāng)含有這些物質(zhì)的溶液濃度改變時,溶液顏色的深淺度也就隨著改變。溶液越濃顏色越深,溶液越稀顏色越淺,因此利用比較溶液顏色深淺的方法來確定溶液中有色物質(zhì)的含量,這種方法稱為“目視比色法”,隨后人們又認(rèn)識到溶液的顏色是由于對光的選擇性吸收而產(chǎn)生的,可以利用濾光片和光電池客觀的測量溶液的濃度,從而出現(xiàn)了“光電比色法”。隨著近代測試儀器的發(fā)展,用分光光度計代替比色計,出現(xiàn)了分光光度法。
配制好的試劑應(yīng)及時盛入試劑瓶,試劑瓶上必須有標(biāo)明名稱、濃度和配制人,配制日期,復(fù)核人,復(fù)核日期的標(biāo)簽,有效期限。
原代細(xì)胞由于轉(zhuǎn)染效率低這個問題,應(yīng)用受到了限制。自從腺病毒誕生后,因?yàn)槠涑瑥?qiáng)的感染能力,克服了原代細(xì)胞難感染的問題,使得原代細(xì)胞的使用變得更加簡單。由于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)后,很多時候需要做到動物體內(nèi),由于原代細(xì)胞有體內(nèi)細(xì)胞的特點(diǎn),為了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果更加趨向一致性,因此用原代細(xì)胞來進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)更值得考慮。
將所需的培養(yǎng)基,胰酶確保瓶身干凈后放于工作臺面內(nèi),點(diǎn)燃酒精燈,將培養(yǎng)基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再將瓶口對準(zhǔn)在酒精燈上消毒2-3次,旋開瓶蓋后再次分別消毒瓶口和瓶蓋,分別放于酒精燈的兩側(cè)。特別是將培養(yǎng)基瓶放于斜架上,瓶口對準(zhǔn)酒精燈,且放在距離酒精燈最近的位置,瓶蓋置于酒精燈的另一側(cè)。
生長在固體培養(yǎng)基上的霉菌菌絲可分為三部分:①營養(yǎng)菌絲:深入的培養(yǎng)基內(nèi),吸收營養(yǎng)物質(zhì)的菌絲;②氣生菌絲:營養(yǎng)菌絲向空中生長的菌絲;③繁殖菌絲:部分氣生菌絲發(fā)育到一定階段,分化為繁殖菌絲,產(chǎn)生孢子。
嚴(yán)格進(jìn)行動物皮膚消毒,使用三套器械取材。新生動物皮膚先用2%碘酒液消毒,成年鼠先用3%~5%碘酒液消毒后用75%酒精消毒。
微生物實(shí)驗(yàn)室及無菌操作臺開紫外燈滅菌1小時,關(guān)閉后至少半小時才進(jìn)入無菌室,我們一般1小時后才進(jìn)去。因?yàn)樽贤鉄粽丈浜笥袣埩簟?/p>
革蘭染色法是細(xì)菌學(xué)中最廣泛使用的一種鑒別染色法。1884 年 由丹麥醫(yī)師 Gram 創(chuàng)立。方法是先將細(xì)菌用結(jié)晶紫染色,加媒染劑(增加染料和 細(xì)胞的親和力)后,用脫色劑(酒精或丙酮)脫色,再用復(fù)染劑染色。如果細(xì)菌 不被脫色而保存原染液顏色者為革蘭陽性菌(G+);如被脫色,而染上復(fù)染液的顏 色者為革蘭陰性菌(G-)。此染色法可將所有具有細(xì)胞壁的細(xì)菌分為兩大類:革蘭 陽性菌和革蘭陰性菌。
盡管擴(kuò)增序列的殘留污染大部分是假陽性反應(yīng)的原因,樣品間的交叉污染也是原因之一。因此,不僅要在進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)是謹(jǐn)慎認(rèn)真,在樣品的收集、抽提和擴(kuò)增的所有環(huán)節(jié)都應(yīng)該注意
熒光定量PCR是實(shí)驗(yàn)室中出鏡率非常高的一種技術(shù)手段。它通過在PCR體系中添加熒光基團(tuán)來顯示DNA產(chǎn)物的累積情況,從而達(dá)到對PCR過程進(jìn)行實(shí)時監(jiān)控的目的。并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。